军中推荐和报名考试通过的士兵学员。这些学员具有一定的文化基础（识千字，能读步兵操典、军纪军令），他们在武备学堂学成之后，将会成为总旗、小旗衔的低级军官。
鉴于太平军的正规化和未来战争需要，周士相创办了这所江南陆军大学。单从名字上看，陆军大学就比兵备讲习所和武备学堂要高大许多。
事实上，陆军大学的名字就是周士相起的，他建立这所陆军大学的目的，也正是为太平军培养中高级将领，使得各级将领能够系统性的学习新的战法和新的知识。
陆军大学除了传统的步马操练，行军步阵等课程外，还开设了天文地理、格致科学、测绘算术、军事指挥、参谋作业、情报分析等课程，除此之外，还有周士相亲自编写的步炮协同战术列在课程之中。大学的教员除了从兵备讲习所和武备学堂抽调一部分人外，原军部的西方雇佣参谋有三分之一进入大学任职，并且新近招募了不少精通算术天文的教官，其中以南怀仁为首的江南传教士就有九人。
为了坚实陆军大学的基础，扩大教职人员，引进新的人材，加强和完善大学的教育体系，周士相已经通过南怀仁向天主教去信，希望天主教能够往东方派来大量优秀教士，并且让广东方面继续重金从澳门招